ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))是一種基于抗原抗體特異性反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)。
植物ELISA試劑盒利用這一原理，通過(guò)將抗原或抗體固定在固相載體上，加入待測(cè)樣本和酶標(biāo)抗體或抗原，經(jīng)過(guò)一系列孵育和洗滌步驟，通過(guò)檢測(cè)酶與底物反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)來(lái)定量或定性分析植物體內(nèi)的目標(biāo)分子。
植物ELISA試劑盒的主要組成：
1.微孔板：通常為96孔或48孔板，用作反應(yīng)容器，便于同時(shí)處理多個(gè)樣本。
2.標(biāo)準(zhǔn)品：純度高、穩(wěn)定性強(qiáng)的靶物質(zhì)，用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，以便對(duì)待測(cè)樣本中的靶物質(zhì)進(jìn)行定量。
3.樣品稀釋液：用于稀釋待測(cè)樣本，確保樣本中的靶物質(zhì)濃度在試劑盒的檢測(cè)范圍內(nèi)。
4.酶標(biāo)試劑：特異的酶標(biāo)記物，能與靶物質(zhì)結(jié)合并催化底物產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。
5.底物：與酶標(biāo)試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化或其他可檢測(cè)的信號(hào)。
6.終止液：停止酶與底物的反應(yīng)，便于讀取結(jié)果。
7.洗滌液：用于清洗微孔板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。
植物ELISA試劑盒的操作流程：
1.包被：將抗原或抗體固定在微孔板上，通常使用緩沖液將抗體稀釋至一定濃度后，在反應(yīng)孔中加入并孵育過(guò)夜。
2.封閉：用封閉液填充微孔板的空白位點(diǎn)，減少非特異性吸附。
3.加樣：將待測(cè)樣本或標(biāo)準(zhǔn)品加入微孔板中，與包被好的抗原或抗體反應(yīng)。
4.孵育：在一定溫度下孵育一段時(shí)間，使抗原抗體充分結(jié)合。
5.洗滌：去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少背景干擾。
6.加酶標(biāo)試劑：加入酶標(biāo)抗體或抗原，與靶物質(zhì)結(jié)合。
7.再次孵育和洗滌：重復(fù)孵育和洗滌步驟，確保酶標(biāo)試劑與靶物質(zhì)充分結(jié)合并去除未結(jié)合的酶標(biāo)試劑。
8.加底物：加入底物溶液，與酶反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。
9.終止反應(yīng)：加入終止液停止酶與底物的反應(yīng)。
10.讀取結(jié)果：使用分光光度計(jì)等儀器測(cè)量反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)強(qiáng)度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣本中靶物質(zhì)的濃度。
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更新時(shí)間：2025-04-14 
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